鏈霉素生產工藝實驗論文
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- 摘要:本次課題利用實驗室條件,模擬鏈霉素的工業生產,首先對高產鏈霉菌進行復壯和篩選然后進行鏈霉素發酵試驗,最后進行提取分離。
在鏈霉素的發酵過程中,我們先通過斜面孢子培養,再通過搖瓶進行種子培養,同時利用正交試驗確定出鏈霉素影響因子的作用為:玉米漿>葡萄糖>黃豆餅粉>(NH4)2SO4。從而計算出鏈霉素發酵生產的培養基除基礎培養基外還應加入:葡萄糖4%,黃豆餅粉0.8%,玉米漿1.5%,(NH4)2SO4 0.5%。按照確定的培養基,放入7升發酵罐中進行放大培養五天,每隔24小時測量包括PH值,DO值,還原糖濃度,鏈霉素效價,生物量等參數。還原糖濃度、鏈霉素效價和生物量的測量分別采用的是DNS法,紫外分光光度法(比色法)和干重法。參數分析后得到解決以下結論:(1) 隨著鏈霉素發酵培養中糖的消耗,鏈霉素的效價也是降低的。說明一次性投料,糖源供應不夠。
(2) PH值在5.2時,鏈霉素效價達到最高,將近4500U/ml。由此確定鏈霉素發酵培養的最適PH值最好控制在這一值上。
(3) 鏈霉菌是好氧菌,菌體的生產及發酵產物的積累都要消耗氧。因此發酵過程當中需保證必須的供氧量。
(4) 生物量與鏈霉素產物的量是此消彼長的關系。
根據參數的變化,我們以單位體積功率相等的原則改變攪拌轉速及空氣流量來進行發酵容積從7升到50升發酵罐的擴大設計,結果放大后的轉速由300r/min變為228r/min。
試驗中,我們用陽離子交換法和膜分離兩種方法對鏈霉素發酵液的分離提取進行對比。結果發現用膜分離法進行提取后產物的效價以及產品的純度遠遠高于用陽離子交換法的。
本次課題,將所得試驗數據進行分析后,我們得出鏈霉素制備的優化主要包括以下兩個方面: (1)鏈霉素的培養基(2)發酵培養時參數的控制。
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